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TD-WS台式大容量离心机提取乳酸脱氢酶及辅酶的方法

更新时间:2016-08-09      点击次数:2664
   通过离心提取乳酸脱氢酶及辅酶用到的材料、试剂及设备有:(1)动物后腿肌肉;(2)9g/LNaCl溶液;(3)活性炭;(4)10g/L乳酸锂溶液;(5)5g/LKCN溶液;(6)乳钵;(7)TD-WS台式大容量离心机等。
 
  TD-WS台式大容量离心机提取乳酸脱氢酶及辅酶的具体操作方法:
 
1、辅酶I的制备:取动物后腿肌肉2g置沸水浴中煮沸4—5分钟(抑制酶的活力,防止将辅酶I破坏),取出冷却、剪碎,加入少许9g/LNaCl溶液及细沙用乳钵研磨成糊状,再加9g/LNaCl溶液8ml混匀,利用台式离心机进行离心沉淀,收集上清液,储冰箱备用。
 
2、乳酸脱氢酶酶蛋白的提取:取动物后腿肌肉2g置乳钵中,加入少许9g/LNaCl溶液及细砂,仔细研磨后再加9g/LNaCl溶液8ml混匀,用双层纱布过滤,滤液加活性炭0.5g振摇数分钟后放置半小时,并时常摇动,然后通过TD-WS台式大容量离心机离心分离,取上清液备用。
 
  在细菌学诊断工作中,常需要从被检材料中分离细菌,并获得纯培养(即单*种细菌的培养物)。因此,通常要用到离心机对样品进行离心分离,细菌的离心机分离培养技术是细菌学诊断中的一项重要基本操作。根据被检材料中可能存在的病原苗的特性,选择适当的培养基和培养条件:(温度、气体环境等)。进行未知菌的初次分离,多用几种培养基,如肉汤、鲜血琼脂、麦康克琼脂等,每种培养基接种数管,分别放在普通环境和厌氧环境中培养。一般经过24—78小时观察结果,但也有一些病原菌,需要培养校长时间才能生长。
 
3、TD-WS台式大容量离心机使用过程注意事项 
 
(1)离心机套管底部要垫棉花或试管垫。  
(2)电动离心机如有噪音或机身振动时,应立即切断电源,即时排除故障。  
(3)离心管必须对称放入套管中,防止机身振动,若只有一支样品管另外一支要用等质量的水代替。  
(4)启动离心机时,应盖上离心机顶盖后,方可慢慢启动。  
(5)分离结束后,先关闭离心机,在离心机停止转动后,方可打开离心机盖,取出样品,不可用外力强制其停止运动。  
(6)离心时间一般1~2分钟,在此期间,实验者不得离开去做别的事。
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